目的：口眼干燥综合征又称Sjogren综合征（Sjogren Syndrome，SS），属于难治性疾病，是一种慢性自身免疫性疾病。其导致的干眼症属泪液缺乏型干眼症，目前除了使用人工泪液外尚无明确有效的治疗方法。导师金明教授近来采用雷火灸熏蒸SS患者的眼部，并联合口服养阴生津方药，取得了较好的临床疗效。本课题按照中医理法方药理论，在细胞生物学水平研究雷火灸联合养阴生津对SS动物模型泪腺病变的影响。即在复制SS动物模型的基础上，采用泪腺组织病理学观察、原位杂交免疫组化检测等手段，探讨雷火灸联合养阴生津法对SS泪腺病变的影响。

方法：

（1） 动物模型：选定非肥胖性糖尿病（nonobese diabetic，NOD）小鼠作为SS的动物模型。

（2） 分组：①正常对照组；②模型组；③灸疗组；④灸疗+中药组；⑤阳性对照组（唯地息眼凝胶）。

（3） 给药：灸疗+中药组用养阴生津方灌胃，每日2次；灸疗组、中药+灸疗组给予雷火灸熏蒸治疗，每次30 分钟，每日2次；阳性对照组用唯地息眼凝胶点眼治疗，每日2次，均用药4周。

（4） 取材：处死动物，取血检测白介素-6含量，取泪腺、胰腺组织制作眼腺、胰腺的石蜡切片，眼腺切片进行伊红、甲苯胺蓝染色以及细胞凋亡、肿瘤坏死因子、白介素-1、核转录因子的免疫组化染色检测，并进行凋亡细胞记数。

（5） 光镜观察：观察泪腺的组织病理学改变，利用免疫组化手段检测肿瘤坏死因子、白介素-1及核转录因子在泪腺中的表达，泪腺中的凋亡细胞。

（6） 图像分析，用Image Plus Pro （IPP）±分析系统测量免疫组化显色强度，进行定量分析，放射免疫方法测定小鼠血清中白介素-6的含量。

（7） 统计分析：采用SPSS软件对数据进行分析处理。

结果：

（1） 模型组泪腺组织中可见较多炎细胞浸润；组织形态学改变可见泪腺腺泡柱状细胞变扁，表现为腺泡腔扩张，腔内有较多深棕色团块样的物质；有的腺泡细胞排列紊乱，腺泡分泌细胞内聚集大量分泌颗粒，细胞间界限几乎消失，表现为腺泡腔塌陷或消失；腺体周围结缔组织内散在较多脱颗粒状态的肥大细胞。灸疗组泪腺中仅见散在炎细胞浸润，泪腺病理形态学改变较模型组有所减轻；灸疗+中药组泪腺组织病理改变较模型组明显减轻，仅见单个炎细胞浸润，腺泡腔扩张和塌陷的程度均较轻，唯地息组则较模型组无差别。

（2） 免疫组化：模型组泪腺中肿瘤坏死因子、白介素-1、核转录因子的表达水平较正常组升高，灸疗组、灸疗+中药组泪腺中三种因子表达较模型组不同地降低。唯地息组较模型组无差别。

（3） 凋亡细胞：模型组泪腺中凋亡细胞较正常组增多，灸疗+中药组较模型组凋亡细胞减少，但无统计学意义。灸疗组、唯地息药组较模型组无差别。

（4） 白介素-6：模型组血清中白介素-6较正常组升高，灸疗+中药组血清中白介素-6水平较模型组降低。灸疗组和唯地息药组较模型组无差别。

结论：

（1） 灸疗、灸疗联合养阴生津方能够改变SS动物模型的泪腺病变，其机制推测可能通过抑制泪腺及全身免疫炎症的通路而实现，具体包括：①调节泪腺中肿瘤坏死因子、白介素-1、核转录因子的表达水平；②抑制泪腺细胞凋亡；③调节血中炎症因子白介素-6水平。实验结果显示灸疗联合养阴生津方对于SS动物模型泪腺病变有明确的改善作用，这对其临床推广使用有重要意义，其机制有待进一步研究探讨。

（2） NOD小鼠作为SS泪腺病变的动物模型是比较理想的。