女性性激素临床实用手册
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(一)性激素检测的常用方法

1.放射免疫分析法(radioimmunoassay,RIA)

(1)该技术是将抗原、抗体反应的高度特异性与放射性核素检测技术的高度灵敏性相结合而建立的检测技术,提高了灵敏度,使免疫分析从定性变为定量,从常量分析提高到微量。

(2)样本用量少,操作简单,试剂成本低是RIA的优点。

(3)但该方法受放射性核素半衰期的影响较大,标记抗原或抗体的不断衰变使每次实验必须同时做标准曲线,不便于短期内发出报告。另外,由于放射性核素不可避免地污染环境,使其逐渐被淘汰。

2.酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)

(1)酶取代放射性核素作为示踪剂,催化底物起到放大信息的作用。该法通过检测显色底物在酶催化下产生的吸光度值测定性激素。

(2)与放免法比较,其优点在于可利用存储的标准曲线。

(3)缺点是反应的底物有毒,酶不稳定,反应需要严格控制温度和p H。此外,该方法灵敏度和重复性低于放射性免疫分析。

3.化学发光免疫分析(CLIA)

(1)该方法将发光物质或酶标记在抗原或抗体上,经过免疫反应后,加入氧化剂或酶底物发光,通过检测发光强度实现样品的定量。

(2)既具有免疫反应的特异性,又有发光反应的高灵敏度,同时具备线性范围宽、标记物有效期长、操作简便、易于实现全自动化、减少人为操作误差等优势。

(3)缺点是试剂成本较高,仪器费用昂贵。

4.电化学发光免疫分析(electro-chemiluminescence immunoassay,ECLIA)

(1)该方法是继放射免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析测定以后的新一代标记免疫测定技术。它将电化学发光和免疫测定相结合,在电极上施加一定的电压或电流时,电极上发生电化学反应,在电极反应产物间或电极反应产物与溶液中某种组分之间发生化学反应而产生激发态,当激发态返回基态时产生化学发光现象。

(2)该方法具有标记物稳定、灵敏度高、重现性好、光信号线性宽等优点。

5.液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS)

(1)LC-MS将高分离能力的色谱技术与高灵敏、高专属性的质谱技术联系起来,成为一种多用途、高灵敏的定性、定量分析方法。

(2)具有高灵敏度、高选择性、高效率、高可靠性等优点,常被作为激素测定的参考方法。

(3)但由于该方法对分析技术和仪器要求高,且仪器价格昂贵,操作复杂,目前未广泛应用于临床。